3 讨论
有研究表明,液氮超低温冷冻有促进种子萌发的作用,王荷等[22]在对25种野生花卉种子进行液氮超低温保存实验中发现,有12种野生花卉种子经液氮冷冻后其发芽率显著提高了。在本研究中,也有观察到,含水量13.50%的杜若种子缓慢冷冻和直接冷冻后的发芽率高于对照组;含水量11.20%的过江藤种子和含水量16.18%、12.75%的皱果苋种子经玻璃化冷冻和缓慢冷冻后,其种子发芽率高于对照组;含水量在9.88%~10.63%的夏枯草种子经液氮冷冻后,种子发芽率高于对照组;含水量在13.86%~18.18%的罗勒种子经直接冷冻后,其种子发芽率高于对照。有可能是液氮冷冻打破了种子的休眠,也有可能是保护剂中的化学物质的刺激[28],具体机理还有待进一步研究。
种子只有在适宜的含水量范围内才能有效进行超低温保存,降香黄檀种子超低温冷冻的最适含水量范围为10.54%~12.35%[24],高良姜种子超低温冷冻的最适含水量范围为12.78%~13.58%[26],白木香种子超低温冷冻的最适含水量为7.35%[29]。本研究所试的6种草本药用植物中,除罗勒外,其余5种草本药用植物均实现了自然含水量下的超低温保存,表明这5种草本药用植物种子自然含水量在液氮超低温保存的安全含水量范围内;而将自然含水量下的罗勒种子经不同时间干燥后,获得7.78%~20.87%含水量范围内的罗勒种子也成功实现了超低温保存。表明多数草本药用植物种子自然含水量在超低温冷冻保存的安全含水量范围之内,需进一步扩大种类加以验证。
我们承建的针对中药材种质超低温保存库——国家南药基因资源库,已于2015年初投入使用,并保存有400多种药用植物种子。本研究成功地对杜若种子、过江藤种子、夏枯草种子、皱果苋种子、山香种子和罗勒种子等6种草本药用植物种子进行了液氮超低温保存,这将为中药材种子的超低温保存提供借鉴,为超低温库的建设提供理论基础,有利于解决药用植物种子批量入库长期有效保存的问题,对推动我国药用植物种质资源安全保护起到积极作用。
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